單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus, HSV)是影響人類健康的重要病毒之一。HSV-1潛伏感染近90%的人群,重激活時(shí)會(huì)引起一系列臨床癥狀,輕者有口腔皰疹,重者會(huì)導(dǎo)致單純皰疹病毒腦 炎。DNA復(fù)制是HSV-1裂解感染階段的核心事件,涉及到HSV-1基因組、病毒蛋白和宿主蛋白等眾多方面的動(dòng)態(tài)變化和有序調(diào)控,但是受到現(xiàn)有分子生物 學(xué)手段和傳統(tǒng)熒光顯微鏡的限制,病毒復(fù)制的細(xì)節(jié)一直難以進(jìn)行觀察。受激發(fā)射損耗顯微鏡(stimulated emission depletion, STED)的分辨率遠(yuǎn)低于衍射極限,將STED顯微技術(shù)與傳統(tǒng)的免疫熒光(immunofluorescence, IF)和熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技術(shù)相結(jié)合,能夠在亞衍射極限水平獲得HSV-1復(fù)制過程中的更多細(xì)節(jié)和信息。
中國科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所周巨民課題組與上海徠卡顯微鏡公司合作,對(duì)不同復(fù)制階段的HSV-1基因組、病毒蛋白和宿主蛋白進(jìn)行超高分辨率圖像采集,通過 分析發(fā)現(xiàn):(1)STED顯微鏡能夠更可靠地分辨HSV-1基因組的不同區(qū)域;(2)HSV-1基因組進(jìn)入宿主細(xì)胞核后,逐漸由壓縮狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)樗缮顟B(tài), 并占據(jù)更大的空間位置;(3)病毒蛋白ICP8與復(fù)制中的HSV-1基因組密切相關(guān);(4)雖然HSV-1的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄都在病毒復(fù)制區(qū)內(nèi)進(jìn)行,但是這兩種 生物學(xué)過程發(fā)生在病毒復(fù)制區(qū)不同的亞結(jié)構(gòu)內(nèi)。
該研究工作在線發(fā)表在病毒學(xué)領(lǐng)域?qū)I(yè)期刊Virology Journal上。周巨民課題組的博士研究生李卓然為第一作者,周巨民研究員為通訊作者。該項(xiàng)研究工作得到了中科院百人計(jì)劃、云南省高端人才項(xiàng)目和云南省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目的資助。